專家解讀病毒檢測的原理是什么？

近日新聞“首個新冠病毒檢測試劑盒經由過程查驗”。那么病毒檢測的道理是什么？來自湖海說神聊仙桃的賓西法尼亞大學病理查驗系副傳授王萍快速撰文講解。因為本文相對比力專業，讀者伴侶若是有任何問題，請在《返樸》留言提問，我們盡快組織答疑。

1、此刻有哪些檢測新型冠狀病毒的方式？

檢測流行癥的策略凡是有兩種：檢測病原體自己，或檢測人體為了抵當病原體而發生的抗體。檢測病原體既可以檢測抗原（一般是病原體概況卵白，有些用內部核卵白），也可以檢測核酸。若是病人的體液中檢測到抗體、抗原或核酸三者中的任何一種，則意味著已被傳染。因為抗體發生需要時候，一般幾天至幾周不等，有些免疫功能較弱的病人可能抗體量很低，輕易造當作假陰性（已經傳染，可是測試成果看起來沒有被傳染）。而在傳染之初，病原體抗原含量也較低，同樣不輕易檢測到。所以，今朝普遍采用的是檢測病原體的核酸序列，經由過程擴增反映來放大旌旗燈號，檢測的活絡度高、特異性好。

早在1月11日，新型冠狀病毒的全基因序列就已發布（由上海市公共衛生臨床中間和公共衛生學院、華中科技大學武漢中間病院、武漢市疾控中間、中國疾控中間流行癥預防節制所結合澳大利亞悉尼大學結合完當作），國內和國際多個廠家和機構都敏捷跟進，開辟檢測試劑盒。檢測試劑盒可以一次性檢測幾百個樣本，而在開辟出檢測試劑盒之前，一般只能經由過程RNA測序方式檢測病毒，速度會很慢。

新型冠狀病毒和SARS病毒的高度同源性對試劑盒設計也有幫忙。因為新型冠狀病毒是RNA病毒，試劑盒檢測根基都采用反轉錄加及時聚合酶鏈式反映法（RT-PCR），擴增病原體的核酸 (RNA) ，同時經由過程熒光探針及時檢測擴增產品。這種方式很活絡，也可以或許很好地定量。宿世界衛生組織（WHO）網站上列有德國、噴鼻港、泰國、日本和中國疾控中間所利用的檢測方式和引物序列，根基都是針對病毒序列中高度保守的2至3個序列——好比編碼replicase（復制酶）或者necleocapsid（核卵白衣，核鞘）的核酸序列——來進行檢測。可是各個方式用的序列都不完全不異。一些方式利用multiplex，也就是把多個方針序列在統一反映管中擴增；另一些采用分步，先用一個方針序列篩查，陽性后再用另一個序列確認。檢測反映的精確水平取決于發布的基因序列的精確水平，以及引物、探針等的設計。從今朝發布的有限數據來看，這些試劑盒的精確率都不錯。因為此刻能檢測的病人都是臨床高度疑似，所以陽性展望值很是高。

也恰是因為這個新型冠狀病毒和SARS的相似性很高，若是傳染的是SARS病毒，成果也會是陽性的。

當然，也可用測序方式更精確簡直認新型冠狀病毒，可是對儀器要求高，速度也慢一些，不適合多量量篩查。

2、為什么要multiplex多重反映？為什么要用多個方針序列？

作為篩查手段，要求是快速和高活絡度。每個RT-PCR反映需要2小時擺布出成果，multiplex也就是多個檢測平行同步進行，可以有用縮短整個流程時候，加速檢測速度。別的病毒變異很快，用多個保守方針序列可以防止病毒變異發生假陰性。

3、采樣今后，多久能拿到成果？

若是就近在統一個病院可以頓時檢測的話，2-3小時就應該可以看到成果，可是本地若是傳染節制或儀器人員前提不敷（見下個問題），就需要把樣本送到區域甚至全國檢測中間（好比疾控中間），加上運輸時候，可能需要上24小時甚至幾天。

4、利用檢測試劑盒有什么要求？為什么不是每個病院都做？

對新型冠狀病毒這樣的疾病來說，檢測所用的血液或其他體液可能具有高傳染性，檢測和離心過程中發生的氣溶膠可能傳染檢測人員，所以對檢測嘗試室在傳染節制方面有很高要求。SARS病毒要求三級生物平安程度（BSL level 3），埃博拉病毒（Ebola）要求四級生物平安程度（ BSL level 4），必需考慮通風、氣壓、樣本流標的目的（指樣本從病房經由過程什么路子到查驗嘗試室，從哪個門進入，達到嘗試臺后從哪個儀器到哪個儀器，燒毀樣本怎么處置，從哪個門出嘗試室等系列流程）等方面（見圖2），檢測人員也要顛末特別練習。從儀器上來說，至少要有離心計心情、核酸提取儀器、及時聚合酶鏈式反映儀器等。所以不是每家病院都有前提做檢測。

圖：微生物危險度品級相對應的典型庇護裝備。（來歷：CDC）

來歷：wikipedia

5、試劑盒欠缺，來不及檢測怎么辦？

試劑盒欠缺影響確診人數的統計，但對臨床治療影響不大，因為迄今還沒有針對新型冠狀病毒的特效藥，臨床上按照病人表示，CT（計較機斷層當作像）看到肺部典型病變，就可以隔離并起頭治療，治療也以供給病人生命撐持為本家兒，沒有需要期待檢測成果確診。如前所述，在疾病高度疑似人群頂用一個機能不錯的檢測試劑去測，因為患病率（disease prevalence）高，測出的陽性成果有很大可能是真陽性（positive predictive value陽性展望值高），而反之測出的若是是陰性成果，是真陰性的可能性不大（negative predictive value陰性展望值低），所以試劑盒檢測成果根基是起確認臨床診斷的感化。

撰文 | 王萍

作者簡介

王萍，湖海說神聊仙桃人，現于賓西法尼亞大學病理查驗系任教，任賓西法尼亞大學病院臨床化學及中間嘗試室本家兒任，致力于臨床疾病檢測，研發和財產轉化最新的疾病診斷預后方式。

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