等電聚焦(IEF),也叫電聚焦,是一種根據分子電荷的差異來分離分子的方法。在等電聚焦中分離分子的能力是基于對pH水平的理解蛋白質的pH值可以在1到12之間。蛋白質的凈電荷量取決于當地環境的pH值。例如,蛋白質可以是中性的,正的或負的凈電荷取決于周圍環境的pH值。任何蛋白質的凈電荷都是其正負電荷的總和。這取決于組成蛋白質的氨基鏈是酸性還是堿性。當酸性基團多于堿性基團時,所產生的pH值就會很低,或者是酸性的。當堿性基團多于酸性基團時,產生的pH值就會很高,或者說是堿性的。大多數蛋白質的pH值都是3-12,濃度在4-7之間。蛋白質在pH值低于蛋白質本身的溶液中帶正電荷。當溶液的pH值高于其自身的pH值時,蛋白質會帶負電。因此,蛋白質的pH值被稱為蛋白質的等電點。當用電場控制蛋白質的環境時,會發生等電聚焦當一個電場作用于蛋白質的環境中時,它會影響蛋白質中粒子的行為。這意味著當蛋白質處于與自身相同的pH值的環境中時,蛋白質中的粒子不會移動。然而,當蛋白質處于一個較低的pH值的環境中時,蛋白質中的粒子不會移動如果蛋白質環境的pH值比自身高,則粒子會向陽極移動。等電聚焦需要控制蛋白質的環境,使其粒子朝所需的方向移動。
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