什么是流式細胞術(Flow Cytometry)？

流式細胞術是研究單個細胞通過液體流的過程。細胞內部或表面的成分，首先必須用一種或多種熒光染料進行標記。流式細胞儀儀器內的激光激發這些熒光分子，使它們發出不同波長的光。熒光量可以指示樣本中不同類型細胞的百分...

流式細胞術是研究單個細胞通過液體流的過程。細胞內部或表面的成分，首先必須用一種或多種熒光染料進行標記。流式細胞儀儀器內的激光激發這些熒光分子，使它們發出不同波長的光。熒光量可以指示樣本中不同類型細胞的百分比。流式細胞術用于用于多種應用的實驗室，包括癌癥研究、免疫學和細胞周期分析。科學家用燒杯進行流式細胞術分析時，必須用熒光染料對單個細胞懸浮液進行染色，這可以通過一步或兩步的過程來完成。細胞蛋白質通常是用針對感興趣的蛋白質的抗體來染色的。一步過程包括用熒光染料標記的抗體來染色細胞。如果沒有標記抗體，細胞可以先用未標記的一級抗體染色，然后用熒光標記的二級抗體染色。一旦細胞被標記，就可以進行流式細胞術分析了。一根裝有細胞懸浮液的試管裝在流式細胞儀上。細胞通過儀器，在激光前以單一方式通過當激光照射到每個細胞時，光被向前或側向散射。前向散射測量顯示了細胞的大小，而側面散射是細胞粒度的測量。激光的能量也會激發熒光鉻分子，用來染色細胞的熒光染料。流式細胞術中常用的激光是氬離子激光器，它的波長為488納米（nm）這種光激發綠色染料熒光素的分子，然后發射波長為525納米的光。流式細胞儀中的光電倍增管（PMT）有濾光片，可以檢測各種熒光色素發出的光。該儀器可以有幾個PMT，檢測不同波長的光。紅色二極管，紫外二極管或氦氖（氦氖）是其他可用于流式細胞儀的激光器。用于流式細胞術分析的其他熒光染料包括藻紅蛋白、德州紅、和，或別藻藍蛋白。激光和熒光染料的不同組合允許研究人員在同一個實驗中收集許多不同細胞標記物的信息。設計用于流式細胞儀的軟件可幫助研究人員可視化數據。使用點圖、密度圖和，或者直方圖。可以在感興趣的細胞周圍畫出區域，熒光強度可以指示樣本中各種細胞的百分比。

發表于 2020-09-18 05:26
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分類：科學教育

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