分光光度計吸光度是指溶液吸收的光的量,用一種叫做吸光度分光光度計的實驗室儀器測量。在化學和生物學中,分光光度計有多種用途。它們可以幫助識別化合物,測定溶液濃度,或者估計懸浮在液體中的細胞數量。分光光度計的工作...
分光光度計吸光度是指溶液吸收的光的量,用一種叫做吸光度分光光度計的實驗室儀器測量。在化學和生物學中,分光光度計有多種用途。它們可以幫助識別化合物,測定溶液濃度,或者估計懸浮在液體中的細胞數量。分光光度計的工作原理是將經過過濾的一組特定波長的光穿過樣品溶液,并照射到測光計上。樣品透射或吸收的光的數量以及吸收的波長,揭示了樣品的一些特性

電磁輻射包括電磁頻譜中一小部分的波長范圍人類視覺上感知到的光是一種能量形式,即電磁輻射,它包括電磁光譜中一小部分的波長。伽馬射線、X射線和其他400納米以下的短波對人眼是看不到的,而且波長也不超過700納米,例如紅外光或無線電波。人類感知到的顏色范圍從穿過彩虹的400納米左右的較短的藍色和紫色波到接近700納米的紅色。分光光度計在可見光范圍內測量,在光譜的紫外和紅外部分有一些重疊當我們看到一種顏色,例如綠葉,我們看到的是該物質所傳遞的光波長。就綠葉而言,植物細胞中一種叫做葉綠素的化合物吸收了太陽白光中的藍色和紅色波長,但對綠色的吸收不強。相反,綠色和接近綠色的波長被傳輸,植物看起來是綠色的。在任何給定的液體溶液中,某些波長的光吸收量大于其他波長。分光光度計引導一束白光穿過被研究的樣品溶液。分光光度計的吸光度是被研究化合物吸收的光的量。這種光在不同波長范圍內被吸收的量不同稱為吸收光譜。吸收光譜有助于識別樣品化合物。例如,有些植物色素吸收的波長與葉綠素不同,可以通過它們的吸收曲線圖來區分,這些圖中分光光度計的吸收率是波長的函數。吸收量最大的波長將在圖上顯示為尖峰,給每個化合物一個特征形狀。溶液的濃度也可以從它的分光光度計吸光度推斷出來這是通過蘭伯特-比爾定律(也稱為比爾定律)來實現的,這是一個通過另外兩個因素將分光光度計的吸光度水平與濃度聯系起來的方程式:消光系數和樣品管的路徑長度或寬度。消光系數是每種化合物不同的化學因素,但它可以通過在分光光度計中測試已知濃度的樣品來確定,然后用比爾定律來求解同一化合物的未知濃度。