什么是聚丙烯酰胺凝膠(Polyacrylamide Gel)？

聚丙烯酰胺凝膠是一種常用于電泳的溶液，通過凝膠和電流將不同大小的分子或顆粒分離出來。聚丙烯酰胺凝膠有不同的配方，但通常含有丙烯酰胺、水、緩沖液、過硫酸銨（APS），以及四甲基乙二胺（TEMED）。這種凝膠作為一種基質，根據其...

聚丙烯酰胺凝膠是一種常用于電泳的溶液，通過凝膠和電流將不同大小的分子或顆粒分離出來。聚丙烯酰胺凝膠有不同的配方，但通常含有丙烯酰胺、水、緩沖液、過硫酸銨（APS），以及四甲基乙二胺（TEMED）。這種凝膠作為一種基質，根據其電荷和大小分離出化合物；凝膠溶液中丙烯酰胺越多，小分子的分離就越好。通常這種凝膠用于蛋白質和DNA分離聚丙烯酰胺凝膠用于蛋白質和DNA的分離。在電泳中，電場使帶電粒子穿過凝膠，它的作用就像篩子一樣，使不同大小的顆粒分離。凝膠可以吸收電流產生的任何熱量。聚丙烯酰胺凝膠通常用于這些步驟，但也可以使用另一種可以產生類似凝膠的化學物質瓊脂糖不同長度的聚丙烯酰胺可以被分離，丙烯酰胺的含量在6%到15%之間，當混合凝膠時，丙烯酰胺是未聚合的，這意味著它仍然是單分子加入其他促進結合的化學物質，如TEMED，使分子連接在一起形成長鏈，即聚丙烯酰胺的“聚”部分硬度可以根據丙烯酰胺和TEMED的初始加入量來控制。丙烯酰胺濃度的一個主要因素是被分析分子的大小。被分離的化合物越小，需要的丙烯酰胺越多；使用最高濃度（15%）分離非常小的顆粒丙烯酰胺的工作原理是控制凝膠中的摩擦力；凝膠的硬度決定了摩擦力的大小。較大的化合物在凝膠中的移動速度會更慢，因為它們的尺寸自然會有更多的摩擦力或阻力。較小的化合物移動速度更快，因為摩擦力較小。為了防止小的化合物從凝膠中移動，添加更多的丙烯酰胺來制造更多的摩擦。DNA聚丙烯酰胺凝膠用于分離不同長度的DNA鏈。DNA片段只需一個核苷酸就可以分離，組成每一條鏈的化合物。為了知道哪些片段代表特定的大小，一個包含已知大小片段的標準通常與樣本一起運行。然后將DNA片段與標準品進行比較，確定鏈的大小一個類似的程序被用來確定蛋白質的大小，通常是血液中的蛋白質血液中含有兩種主要的蛋白質：球蛋白（一種大尺寸的蛋白質）和血清白蛋白（一種非常小的帶負電的蛋白質），用聚丙烯酰胺凝膠分離來確定每種類型的數量

發表于 2020-08-23 05:09
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分類：科學教育

什么是聚丙烯酰胺凝膠(Polyacrylamide Gel)？

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