肽是由氨基酸組成的小聚合物,許多具有生物活性,如激素、毒素或其他功能。這類化合物常用于生物、醫療、醫療等領域,以及化學研究。當大量的蛋白質連接在一起時,它們也是蛋白質的組成部分。肽純化是一種用來純化大量所需肽...
肽是由氨基酸組成的小聚合物,許多具有生物活性,如激素、毒素或其他功能。這類化合物常用于生物、醫療、醫療等領域,以及化學研究。當大量的蛋白質連接在一起時,它們也是蛋白質的組成部分。肽純化是一種用來純化大量所需肽的技術,或者幫助分離蛋白質消化過程中產生的肽。

不同的肽在不同的時間點洗脫,并通過監視器(通常是紫外分光光度計)進行檢測。肽的純化是通過使用色譜技術,一種分離不同結合的化合物的方法來完成的高壓液相色譜法(HPLC)通常用于肽的純化。當在高壓下通過一個小珠柱時,一個或多個肽被應用于溶劑混合物中,隨著時間的推移,這些溶劑會隨著時間的推移而變化。不同的肽在不同的時間點洗脫,并通過監視器進行檢測,通常使用紫外分光光度計。

肽純化是一種用于純化大量所需肽或幫助分離蛋白質消化產生的肽的技術,通常感興趣的物質是稀有的,不能從化學公司購買。如果已知所需肽的結構,通常通過肽合成化學制備比從天然來源分離化合物容易得多。天然產物分離是出了名的困難。合成肽通常用高效液相色譜法純化。這種化學合成對于一個不是化學家的獨立研究人員來說可能是令人望而生畏的經常,這項任務由專門從事這些技術的肽合成公司承包。這可能比在實驗室里從頭開始建立系統更經濟。肽公司可以根據研究人員的需要定制肽。肽純化的另一個原因是研究人員用質譜儀分離蛋白質片段,然后用質譜儀測定蛋白質碎片,液相色譜-質譜法是液相色譜-質譜法的縮寫。它給出了片段的分子量和氨基酸組成,如果之前已經鑒定出相似或相同的蛋白質,通常可以識別蛋白質。許多研究人員研究具有新特征的肽,如非天然氨基酸,試圖找到具有特殊生物活性的化合物。有一個叫做擬肽組學的領域專門研究這種新的肽。通常,計算機生成的序列被設計出來,我們合成了一個包含一系列非典型肽的肽庫。肽純化被用來分離這個庫中的單個成員,以提供純肽來測試生物活性。這個策略已經成功地產生了至少一種新的商用藥物,其中許多具有生物活性肽在醫學上有著重要的用途。商業上使用的化合物,如胰島素,通常是由重組DNA過度表達系統產生的,這些系統可以產生大量所需的化合物。通常,這些肽是經過基因工程改造的,通過在其前端添加某種標簽來促進純化,這就允許使用親和層析來純化肽在這種色譜法中,標記物是一種化合物,比如組氨酸,它能結合一種珠子基質,比如鎳,因為它能與標簽結合而被選中。不需要的蛋白質和肽通常不需要結合就可以通過色譜柱。特別設計的肽通常與色譜柱緊密結合。在污染的蛋白質和肽被洗掉后,所需肽被一種競爭性結合到基質上的化合物洗脫,然后制備出相當純的所需肽,并且可以通過切割去除標簽。

肽純化用于重組DNA過度表達生產胰島素。