什么是重組質粒(Recombinant Plasmid)？

質粒是在許多細菌中發現的環狀DNA片段。質粒最顯著的特點是它們獨立于宿主的主要DNA進行復制。在重組克隆技術中，通常使用質粒來克隆新分離的基因。使用重組質粒來表達大量的這種重組基因的表達對于生物技術產業來說是...

質粒是在許多細菌中發現的環狀DNA片段。質粒最顯著的特點是它們獨立于宿主的主要DNA進行復制。在重組克隆技術中，通常使用質粒來克隆新分離的基因。使用重組質粒來表達大量的這種重組基因的表達對于生物技術產業來說是不可或缺的大腸桿菌。重組質粒最早是在細菌界的實驗鼠身上開發出來的，大腸桿菌。許多其他類型的細菌都可以攜帶這種質粒。這些自我復制的DNA片段可以在不同類型的細菌之間自然轉移。盡管如此，有時很難將重組質粒導入其他種類的細菌中

重組細菌在生物學研究中具有巨大的價值，在工業和環境方面。將DNA導入其他細胞的主要步驟是轉化，在這種方法中，細菌被化學物質處理，使它們更有可能吸收外來DNA。另一種技術是用電流電擊細菌這就是所謂的電穿孔。

質粒可以單獨復制一個人；產生重組質粒的原因各不相同。通常，當DNA最初從某個組織或生物體中分離出來時，它會轉化為質粒來建立一個文庫，然后從中提取出DNA單個菌落。接下來，如果序列存在于數據庫中，可以通過DNA測序來篩選它們，以確定存在何種類型的基因。有時，功能未知的基因被克隆。在其他情況下，基因產物是眾所周知，但是研究人員希望表達大量的這種基因以備進一步研究。這種基因可以被克隆到過度表達載體的重組質粒中，它們被設計用來產生大量的RNA或蛋白質。這對于重組人蛋白來說尤其有價值，因為以前的重組人蛋白通常只有尸體上可以找到，這使得研究一個特定基因的功能變得非常困難。構建一個可用于分子克隆的質粒涉及到幾個因素。質粒必須有一個可選擇的標記。這使得選擇一個帶有基因的細胞。通常情況下，缺少帶有標記物的基因的細胞數量遠遠超過攜帶該基因的細胞數量。一般來說，重組質粒對抗生素有耐藥性，或者在沒有特定氨基酸的情況下也能生長這樣的質粒需要一個復制源，這樣它才能開始合成重組DNA。此外，重組質粒需要一組特殊的序列，使限制性內切酶能夠切割DNA，從而將基因插入到克隆載體中。有大量的限制性酶對特定的DNA序列高度專一，這些序列必須存在于基因的起始和結束處傳統的細菌菌株已經被用于DNA克隆幾十年了。此外，有一些新的試劑盒使用特別構建的細菌菌株來促進基因產物的過度表達，它們將基因克隆技術與一種方法相結合，這種方法一旦被克隆到重組質粒中，就可以很容易地純化從基因中表達出來的蛋白質

許多細菌含有質粒。