等電點是多少(Isoelectric Point)？
蛋白質是由氨基酸鏈組成的，每個氨基酸的pH值都不同。蛋白質的總pH值是由單個氨基酸在溶解它們的特定溶液中形成離子時的pH值的混合物組成的。蛋白質的等電點（pI）是指蛋白質沒有網的pH值電荷。利用這一特性，可以將具有已知...
蛋白質是由氨基酸鏈組成的，每個氨基酸的pH值都不同。蛋白質的總pH值是由單個氨基酸在溶解它們的特定溶液中形成離子時的pH值的混合物組成的。蛋白質的等電點（pI）是指蛋白質沒有網的pH值電荷。利用這一特性，可以將具有已知pI的蛋白質與異質混合物中的其他蛋白質分離。
低于等電點的蛋白質帶正電荷，高于該點的蛋白質帶負電荷。氨基酸具有堿性的氨基端基，具有較高的pH值氨基酸的另一端是羧基末端，它是酸性的，pH值較低。在不同的pH值下，蛋白質上的氨基酸的電荷會發生變化。低于等電點的蛋白質帶正電荷，而高于這一點的蛋白質則帶負電荷蛋白質純化，蛋白質的混合物受到電場的作用。這通常是在瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠中進行的，被稱為等電聚焦。一種較老的技術是在玻璃柱中用兩端帶有電極的蔗糖溶液在更大范圍內進行該過程。這種化合物被稱為兩性聚合物當凝膠或色譜柱受到電流的作用時，蛋白質會遷移到它們的等電點，然后保持靜止。凝膠上的蛋白質通常通過結合蛋白質的染料可見。有時，如果正在研究酶，一種底物可用于產生有色反應。通常使用具有已知等電點蛋白質的標準品一旦人們知道了所需蛋白質的位置，一種常見的技術是從凝膠中分離出蛋白質，然后對蛋白質進行純化和測序。一旦序列已知，它就可以用來設計聚合酶鏈反應（pcr）的引物，并在合適的核酸材料的情況下用于克隆蛋白質的基因等電聚焦也是分析密切相關的蛋白質的一種常用方法，以了解它們之間的差異。一個復雜的情況是蛋白質會有糖結合在它們身上。這被稱為糖基化，并會影響蛋白質的pI。看起來可能有多個不同的蛋白質等電點，當實際上只有一種蛋白質被糖基化時，用標準方法如色譜法純化的蛋白質，有時用等電聚焦法分析，以確保其純度。
低于等電點的蛋白質帶正電荷，高于該點的蛋白質帶負電荷。氨基酸具有堿性的氨基端基，具有較高的pH值氨基酸的另一端是羧基末端，它是酸性的，pH值較低。在不同的pH值下，蛋白質上的氨基酸的電荷會發生變化。低于等電點的蛋白質帶正電荷，而高于這一點的蛋白質則帶負電荷蛋白質純化，蛋白質的混合物受到電場的作用。這通常是在瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠中進行的，被稱為等電聚焦。一種較老的技術是在玻璃柱中用兩端帶有電極的蔗糖溶液在更大范圍內進行該過程。這種化合物被稱為兩性聚合物當凝膠或色譜柱受到電流的作用時，蛋白質會遷移到它們的等電點，然后保持靜止。凝膠上的蛋白質通常通過結合蛋白質的染料可見。有時，如果正在研究酶，一種底物可用于產生有色反應。通常使用具有已知等電點蛋白質的標準品一旦人們知道了所需蛋白質的位置，一種常見的技術是從凝膠中分離出蛋白質，然后對蛋白質進行純化和測序。一旦序列已知，它就可以用來設計聚合酶鏈反應（pcr）的引物，并在合適的核酸材料的情況下用于克隆蛋白質的基因等電聚焦也是分析密切相關的蛋白質的一種常用方法，以了解它們之間的差異。一個復雜的情況是蛋白質會有糖結合在它們身上。這被稱為糖基化，并會影響蛋白質的pI。看起來可能有多個不同的蛋白質等電點，當實際上只有一種蛋白質被糖基化時，用標準方法如色譜法純化的蛋白質，有時用等電聚焦法分析，以確保其純度。
- 發表于 2020-09-06 17:30
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- 分類：科學教育
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