抗體接合成本高昂在時間和試劑方面。組織學和蛋白質組學分析通常依賴抗體作為研究技術中的試劑,通過這種方法可以標記特定的蛋白質。通過將感興趣的抗原或蛋白質暴露于針對其產生的抗體中,可以標記抗原或蛋白質。通過使用抗體結合物-即,一種抗體,它與一種特別使用或合成的易于檢測的分子相結合,然后就可以鑒定和分析它們各自抗原上的抗體。最常見的抗體結合物是熒光分子,允許在熒光顯微鏡下識別組織中的抗原。其他的結合物包括像辣根過氧化物酶這樣的分子,它被用來與抗體結合,以便以后與二氨基聯苯胺(DAB)結合。
,抗體產生一種化學反應,最終導致抗原的破壞。通常情況下,一級抗體會針對特定抗原而產生,而次級抗體則會與標記分子結合,并針對主要抗體而升高。例如,人們可能對識別一種叫做抗原X的抗原感興趣例如,人們可以使用在小鼠體內培養的抗體,這種抗體能與抗原X發生反應并粘附在抗原X上。為了能夠找到這些主要的小鼠抗體在哪里發現并與這些抗原X分子結合,那么就要使用一種二級抗體——例如,一種在山羊體內培養的抗體,它會被一種結合物標記,使這種二級抗體可以在酶顯微鏡或熒光顯微鏡下檢測到,金顆粒通常用作抗體結合物,因為它們可以用電子束檢測到。使用一級和二級抗體,而不是使用一級抗體直接結合的抗體結合物,成本效益高。抗體偶聯在時間和試劑方面都很昂貴。特別是對于不常見的抗原,在一級抗體上進行抗體偶聯并不值得花費大量的生產費用,相反,通過在二級抗體上進行抗體偶聯,可以一次合成大量的結合抗體并加以使用在一系列的初級抗體的分析中,可以定位許多不同的抗原,這使得生產過程有價值而且成本效益高,一種初級抗體將被標記以減少檢測信號中的噪聲,這是由于使用多個抗體而導致的非特異性抗體結合增強,高靈敏度的檢測仍然需要這種方法。可以購買試劑盒,讓研究人員將偶聯物標記到他們自己選擇的抗體上,增加試劑的成本,但減少了方案步驟,并可能在最終抗體檢測分析中提高信噪比
標記到抗體結合物上的抗體是研究中常用的工具。
                    0 篇文章
如果覺得我的文章對您有用,請隨意打賞。你的支持將鼓勵我繼續創作!