什么是南方污點(Southern Blot)？
Southern blot是一種用于檢測樣本中DNA含量的技術，它以edwinsouthern命名，英國生物學家，他在20世紀70年代開創了這項技術。Southern印跡分析使用凝膠電泳分離樣本中的DNA片段，然后使用探針檢測感興趣的DNA序列。 Southern...
Southern blot是一種用于檢測樣本中DNA含量的技術，它以edwinsouthern命名，英國生物學家，他在20世紀70年代開創了這項技術。Southern印跡分析使用凝膠電泳分離樣本中的DNA片段，然后使用探針檢測感興趣的DNA序列。
Southern blot技術最簡單的用法是使用探針來識別感興趣的DNA序列，或者它必須被分離出來用于其他用途。Southern blotting首先從細胞中提取DNA樣本，然后用限制性酶將核酸切割成大小不等的片段，然后通過變性瓊脂糖凝膠電泳將這些片段分為單鏈同時也按大小分開。
Southern blot是一種用于檢測樣本中DNA含量的技術。Southern雜交的下一步是將分離的DNA片段轉移到尼龍或硝化纖維上，它使碎片保持不動，然后用單鏈DNA的雜交探針培育薄片。探針的序列被設計成能與實驗試圖檢測的DNA序列相結合。如果樣本中存在探針片段，則每個探針片段都將與其互補的DNA序列相結合形成一段雙鏈DNA。探針用放射性同位素或酶標記。在同一個實驗中可以使用多個探針。培養完成后，Southern印跡過程的最后一步是揭示探針與互補DNA結合的位置如果探針被標記有放射性同位素，這是通過使用x射線來檢測探針與樣本DNA片段雜交的點來完成的。當使用酶時，將進行進一步的培養。用于此目的的酶是指當它與底物反應時產生有色產物的酶，因此，Southern雜交是通過添加底物來揭示探針DNA與樣本DNA結合的位置來完成的。Southern印跡法有多種用途。Southern印跡法最簡單的用途是使用探針來識別感興趣的DNA序列，或者必須分離出用于其他用途的DNA序列。Southern印跡法也用于確定一個特定序列在一個樣本中有多少個拷貝。這是可能的，因為當一個序列有更多的拷貝并與探針結合時，會產生更強的放射性或酶信號。這項技術的另一個常見用途是對細菌和其他微生物進行基因操作。在這種情況下細菌DNA探針檢測外源DNA是否成功導入細菌，Southern印跡法也是限制性片段長度多態性技術的基礎。
Southern blot技術最簡單的用法是使用探針來識別感興趣的DNA序列，或者它必須被分離出來用于其他用途。Southern blotting首先從細胞中提取DNA樣本，然后用限制性酶將核酸切割成大小不等的片段，然后通過變性瓊脂糖凝膠電泳將這些片段分為單鏈同時也按大小分開。Southern blot是一種用于檢測樣本中DNA含量的技術。Southern雜交的下一步是將分離的DNA片段轉移到尼龍或硝化纖維上，它使碎片保持不動，然后用單鏈DNA的雜交探針培育薄片。探針的序列被設計成能與實驗試圖檢測的DNA序列相結合。如果樣本中存在探針片段，則每個探針片段都將與其互補的DNA序列相結合形成一段雙鏈DNA。探針用放射性同位素或酶標記。在同一個實驗中可以使用多個探針。培養完成后，Southern印跡過程的最后一步是揭示探針與互補DNA結合的位置如果探針被標記有放射性同位素，這是通過使用x射線來檢測探針與樣本DNA片段雜交的點來完成的。當使用酶時，將進行進一步的培養。用于此目的的酶是指當它與底物反應時產生有色產物的酶，因此，Southern雜交是通過添加底物來揭示探針DNA與樣本DNA結合的位置來完成的。Southern印跡法有多種用途。Southern印跡法最簡單的用途是使用探針來識別感興趣的DNA序列，或者必須分離出用于其他用途的DNA序列。Southern印跡法也用于確定一個特定序列在一個樣本中有多少個拷貝。這是可能的，因為當一個序列有更多的拷貝并與探針結合時，會產生更強的放射性或酶信號。這項技術的另一個常見用途是對細菌和其他微生物進行基因操作。在這種情況下細菌DNA探針檢測外源DNA是否成功導入細菌，Southern印跡法也是限制性片段長度多態性技術的基礎。
- 發表于 2020-09-07 15:12
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- 分類：科學教育
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