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    什么是RNA凝膠電泳(RNA Gel Electrophoresis)?

    在生物化學中,RNA凝膠電泳是一種常用的分析生物分子核糖核酸(RNA)的方法。凝膠電泳通過凝膠狀化學物質制成的薄片"篩分"分子的大小和電荷來分離分子。這一過程通常用于實驗室分析碎片脫氧核糖核酸(DNA)或RNA中含有有機體遺...
    在生物化學中,RNA凝膠電泳是一種常用的分析生物分子核糖核酸(RNA)的方法。凝膠電泳通過凝膠狀化學物質制成的薄片"篩分"分子的大小和電荷來分離分子。這一過程通常用于實驗室分析碎片脫氧核糖核酸(DNA)或RNA中含有有機體遺傳信息的分子。RNA凝膠電泳與DNA凝膠電泳在程序上略有不同,因為RNA分子不像DNA,是單鏈鏈,容易折疊成結構。這使得RNA片段按大小分離更為困難RNA凝膠電泳在程序上與DNA凝膠電泳略有不同,因為RNA分子是單鏈鏈,容易折疊成結構RNA凝膠電泳的第一步是從樣本生物細胞中分離出RNA分子,將樣本組織溶解在一種特定的化學混合物中進行純化,以去除酶RNase,蛋白質,尤其重要的是,在這個過程中,樣品在任何時候都不被核糖核酸酶污染,因為核糖核酸酶催化核糖核酸分子的降解,導致它們分裂。在樣品被純化后,將其冷凍,并加入另一種化學物質使核糖核酸沉淀,或以固體形式從溶液中滴出然后將樣品放入離心機,離心機以高速旋轉,并分離出樣品管底部的固體沉淀物實驗室使用凝膠電泳分析RNA片段。在DNA或RNA凝膠電泳程序中,純化后的生物分子被添加到平的凝膠板一端的孔中,然后電流流過凝膠。由于DNA和RNA分子帶負電,它們被吸引到凝膠遠端的正極上,凝膠中的孔隙大小固定,因此較小的DNA或RNA片段比較大的片段遷移得更快,后者在多孔基質中的導航更困難凝膠運行一段時間后,切斷電流并檢查結果。此時可以對DNA或RNA分子進行染色并使其可見。每個片段將在凝膠中的不同點顯示為一條帶,這取決于它在凝膠中的遷移距離在比較樣本時,如在法醫學中,確定是否存在匹配的片段是有用的,相同的樣本會有相同的帶型凝膠可以運行,在正常情況下,RNA分子會聚集或折疊成二級結構,影響RNA片段在凝膠中的流動性為了防止這種情況的發生,RNA樣品必須通過在樣品和凝膠中添加一種化學物質(如甲醛)使其變性。
    • 發表于 2020-08-24 07:15
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    • 分類:科學教育

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